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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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豬源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-P64491
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-10-07
  • 更新日期: 2025-03-19
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BK-P64491
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50次
純度 詳見說明書%
CAS編號
是否進口

本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產品名稱

規格

貨號

豬源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

50

BK-P64491

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 765432
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

脂蛋白酯酶(LPL)&肝脂酶(HL)測試盒   可見分光光度法   50/48  Atractylodin  55290-63-6  中文名:蒼術素  分子式:C13H10O 

脂蛋白(a[LPa]測試盒   Lipoprotein (a) [LP (a)] test case  Valsartan methyl ester  中文名:  分子式:C25H31N5O3 

整合素α5β3   英文名稱:   Iegrin α5β3   規格:   48T/96T   英文縮寫:   Iegrin α5β3  Wallicoside  中文名:斷節參苷  分子式:C61H98O26 

整合素α2β1   英文名稱:   Iegrin α2β1   規格:   48T/96T   英文縮寫:   Iegrin α2β1  Wallicoside  中文名:斷節參苷  分子式:C61H98O26  度:98.0%

蔗糖酶試劑盒   可見分光光度法   50/48              Withanolide C  108030-78-0  中文名:醉茄內酯分子式:C28H39ClO7
臍動脈內皮細胞RNAHUAEC miRNA5 μg硫酸異帕米星質量規格:含量≥670μg/mgIsepamicine Sulphate

G401細胞,Wilms細胞 大鼠垂體細胞,RPC細胞 CL-0462UMR-106(大鼠細胞)5×106cells/瓶×2蓓薩羅丁;貝沙羅汀質量規格:>99%Bexarotene

HCC94(鱗癌細胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2氯前列醇鈉(D型)質量規格:>98.5%D-Cloprostenol

hCD133+-CB-c single donor 從臍帶血提取的類CD133+祖細胞(hCD133+-CB),單一捐獻者 100000 大鼠垂體細胞RPC氯前列醇鈉(DL型)質量規格:>98.5%,USP34DL-Cloprostenol

CSC, 小鼠心肌細胞鹽酸川芎嗪(標準品)質量規格:HPLC98%,標準品Ligustrazine HCl
角膜上皮細胞完全培養基 100mL二甲基亞砜(AR,>99%(GC)) Dimethyl sulfoxide質量規格:AR,>99%(GC)

HPT-8細胞,小鼠飼養層上皮細胞 293(轉染腺病毒E1A基因的腎上皮細胞) 長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184二甲基亞砜(>99.8%(GC)) Dimethyl sulfoxide質量規格:>99.8%(GC)

EFNB2 Protein Human 重組 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 標簽)二甲基亞砜(分子生物學,99.9%) Dimethyl sulfoxide質量規格:分子生物學,99.9%

EA.hy926(臍細胞融合細胞) 5×106cells/瓶×2 大隱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)二甲基亞砜(多肽合成) Dimethyl sulfoxide質量規格:多肽合成

腦微內皮細胞HBMEC二甲基亞砜(藥用級) Dimethyl sulfoxide質量規格:藥用級
Colelomycerone A  中文名:  分子式:C17H18O6    豬調節蛋白elisa試劑盒   豬調節蛋白試劑盒   規格型號:96T/48T 

Clotrimazole  中文名:克霉唑  分子式:C22H17ClN2    豬性因子elisa試劑盒   豬性因子試劑盒   規格型號:96T/48T  

Clorofene  中文名:4--2-芐基苯酚  分子式:C13H11ClO    豬細胞粘附分子-1elisa試劑盒   豬細胞粘附分子-1試劑盒   規格型號:96T/48T 

Clopidogrel bisulfate  中文名:硫酸氫氯吡格雷  分子式:C16H18ClNO6S2    豬血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Clevidipine butyrate  中文名:丁酸氯維地平  分子式:C21H23Cl2NO6    豬血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
豬源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

聯系方式
手機:13564080845
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