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產(chǎn)品簡稱：GCT0404細胞
中文名稱：人細胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E0579

帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等，更大就是反應器了。

帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用（如單克隆細胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細胞實驗用（一般性的傳代，保存細胞，為實驗提供細胞等），25ml一般是用來復蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng)，還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項：
1.細胞復蘇
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中，加入37oC預熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%（過量不足，過晚細胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細胞一代，即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間，非細胞有絲分裂次數(shù)）時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度）進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細胞凍存
當細胞密度達到80%~90%時，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護細胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。 
細胞凍存和復蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷，引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進而促使細胞死亡。
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N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)  N-Acetyl-cysteine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人甘油二酯(DAG)試劑盒 Human diacylglycerol,DAG ELISA kit

佐匹克隆    質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BP2009,BR RatImmunoglobulinG,IgGELISAKit大鼠球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

佐匹克隆(標準品)    質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品 BrdU標記法細胞繁殖比色法定量檢測試劑盒10/50

阿尼西坦，回拉西坦;茴拉西坦  Aniracetam  質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BR MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

阿尼西坦(標準品)  Aniracetam  質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品 小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒 ，英文名： NF ELISA Kit

L-谷氨酰胺  L-Glutamine  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 小鼠生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA檢測試劑盒Mouseangiopoietieceptoie2,ANG-R-Tie2ELISAkit 96T/48T

羅氟司特  Roflumilast  質(zhì)量規(guī)格：含量≥99.0%(HPLC) 人甘露糖受體(MR)試劑盒 Human mannose receptor,MR ELISA Kit
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HPAC(人胰腺腺泡上皮癌) 5×106cells/瓶×2 短小芽孢桿菌異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷（標準品）Isorhamnetin 3-glucoside-7-rhamnoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,標準品

角膜內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)5'-tert-Butyldimethylsilyloxy 美洛昔康5'-tert-Butyldimethylsilyloxy Meloxicam質(zhì)量規(guī)格：美國進口

GRK5 Others Human 人 GRK5 / GPRK5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 甲氨蝶呤二甲基酯Methotrexate Dimethyl Ester質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292甲氨蝶呤-甲基-d3，二甲基酯Methotrexate-methyl-d3, Dimethyl Ester質(zhì)量規(guī)格：美國進口
GCT0404細胞RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細胞裂解液 (陽性對照) Δ2-頭孢他啶質(zhì)量規(guī)格：美國進口Δ2-Ceftazidime

CL-0077Eca-109(人細胞)5×106cells/瓶×2頭孢他啶五水化合物質(zhì)量規(guī)格：美國進口Ceftazidime Pentahydrate

Wish細胞，人羊膜細胞系 人T細胞瘤,Hat-78細胞 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2頭孢唑啉質(zhì)量規(guī)格：美國進口Cefazolin

BGC823(人細胞) 5×106cells/瓶×217β-羧酸氟替卡質(zhì)量規(guī)格：美國進口Fluticasone 17β-Carboxylic Acid

CTSB Others Human 人 Cathepsin-B / CTSB 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢羥氨芐 質(zhì)量規(guī)格：>950μg/mg,BRCEFADROXIL
注意事項：
GCT0404細胞（1）預熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴格的無菌操作；
（6）貼壁細胞消化適度：消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作，每種細胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細胞瓶口每次打開或者關閉都需要在酒精燈上消毒。