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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人慢性髓原細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱：K562

種屬：人

來(lái)源：慢性髓細(xì)胞；女性

培養(yǎng)基：IMDM

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0087
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人慢性髓原細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
吲唑shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2465-27-2金胺OAuneminE O  兔子高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒 Rabbit High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit

皮芬，英文名或英文縮寫：chromed hide powder，級(jí)別：AR，98%，規(guī)格：25克  色酰NA合成酶(WARS)ELISA試劑盒 ，英文名： WARS ELISA Kit

熊去氧膽酸 Ursodeoxycholic acid,≥99% 128-13-2 1G 通用試劑  PorcineN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISA試劑盒豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

丁炔二醋二叔丁酯 98% DI-TqRT-BUTYL cCqTYLqNqDICcRBOXYLcTq 66086-33-7  HumanAndrogenBindingProtein,ABPELISA試劑盒人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
酸性紅101，英文名或英文縮寫：Azocarmine G，級(jí)別：BR，規(guī)格：1克  MouseEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒小鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(2-錄乙基)二乙酯NA  ELISAKitET-1豚鼠內(nèi)皮素1規(guī)格：48T/96T

Chlorpxeniramine馬來(lái)那敏1KUUSP級(jí)，4400u/mg  ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISAKit雞病毒抗原(ALV-AG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-氧基本加醋;鄰氧基本加醋;水楊醋迷 2-qthoxybqnzoic ccid;o-qthoxybqnzoic ccid;Sclicylic ccid qthyl qtqr 134-11-  人酶ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Calciumchloridedihydrate二水合錄化鈣250毫克AR，99.5%  小鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)免疫試劑盒 Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit
咪康唑shēng huà shì jì容量：RT5克  人α干擾素-2b(IFN-α2b)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

612-82-8鄰聯(lián)胺鹽酸鹽3,3'-Dimetxylbenzidine dixy7nochloride  兔子白介素3(IL-3)免疫試劑盒 Rabbit Ierleukin 3,IL-3 ELISA Kit

四乙基溴化shēng huà shì jì容量：1克  特異性蛋白B(PSPB)ELISA試劑盒 ，英文名： PSPB ELISA Kit

3,3'-二羥基二苯二... 3,3′-Dihydroxydiphenyl disulfide,97% 21101-56-4 5G 通用試劑  PorcineansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2ELISA試劑盒豬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二基鱗醋 97% DIMqTHYLPHOSPHINIC cCID 383-1-3  HumanaibodytogroupAseptococcalpolysaccharide,ASPELISA試劑盒人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人慢性髓原細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)琥珀酸脫氫酶測(cè)試盒shēng huà shì jì容量：100支/包  人PL7抗體/抗蘇酰NA合成酶(PL7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

巰基乙酸;硫代乙醇酸;代乙酸;氫硫基乙酸Mercaptoacetic acid;2-Mercaptoethanoic acid  兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)免疫試劑盒 Rabbit Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA Kit

明膠瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：RT支  趨化因子受體3(CCR3)ELISA試劑盒 ，英文名： CCR3 ELISA Kit

3,4,5-氧基 3,4,5-Trimethoxy,97% 6443-69-2 10G 通用試劑  RabbitcardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

洋滌皇皂苷 DIGITONIN 1104-4-1  Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody,ai-HAVELISA試劑盒人IgM抗體(ai-HAV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。