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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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人慢性髓原細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):AE0087
  • 價(jià)格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-29
  • 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號(hào) AE0087
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來(lái)源 慢性髓細(xì)胞白血病;女性
細(xì)胞形態(tài) 懸浮
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號(hào)
保質(zhì)期 詳見說(shuō)明書
器官來(lái)源 詳見說(shuō)明書
免疫類型 詳見說(shuō)明書
品系 詳見說(shuō)明書
生長(zhǎng)狀態(tài) 詳見說(shuō)明書
物種來(lái)源
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人慢性髓原細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱:K562

種屬:人

來(lái)源:慢性髓細(xì)胞;女性

培養(yǎng)基:IMDM

狀態(tài):懸浮

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號(hào):AE0087
基本特性:
1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml
5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
6 )不含有 HIV-1 HBV HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法:
收到細(xì)胞人慢性髓原細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于375% CO2培養(yǎng)箱中。
吲唑shēng huà shì jì容量:281  人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2465-27-2金胺OAuneminE O  兔子高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒 Rabbit High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit

皮芬,英文名或英文縮寫:chromed hide powder,級(jí)別:AR98%,規(guī)格:25  色酰NA合成酶(WARS)ELISA試劑盒 ,英文名: WARS ELISA Kit

熊去氧膽酸 Ursodeoxycholic acid,99% 128-13-2 1G 通用試劑  PorcineN-terminalprocollagenpropeptide,PNPELISA試劑盒豬Ⅲ型前膠原肽(PNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

丁炔二醋二叔丁酯 98% DI-TqRT-BUTYL cCqTYLqNqDICcRBOXYLcTq 66086-33-7  HumanAndrogenBindingProtein,ABPELISA試劑盒人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酸性紅101,英文名或英文縮寫:Azocarmine G,級(jí)別:BR,規(guī)格:1  MouseEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒小鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

(2-錄乙基)二乙酯NA  ELISAKitET-1豚鼠內(nèi)皮素1規(guī)格:48T/96T

Chlorpxeniramine馬來(lái)那敏1KUUSP級(jí),4400u/mg  ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISAKit雞病毒抗原(ALV-AG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

2-氧基本加醋;鄰氧基本加醋;水楊醋迷 2-qthoxybqnzoic ccid;o-qthoxybqnzoic ccid;Sclicylic ccid qthyl qtqr 134-11-  人酶ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Calciumchloridedihydrate二水合錄化鈣250毫克AR99.5%  小鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)免疫試劑盒 Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit
咪康唑shēng huà shì jì容量:RT5  人α干擾素-2b(IFN-α2b)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

612-82-8鄰聯(lián)胺鹽酸鹽3,3'-Dimetxylbenzidine dixy7nochloride  兔子白介素3(IL-3)免疫試劑盒 Rabbit Ierleukin 3,IL-3 ELISA Kit

四乙基溴化shēng huà shì jì容量:1  特異性蛋白B(PSPB)ELISA試劑盒 ,英文名: PSPB ELISA Kit

3,3'-二羥基二苯二... 3,3-Dihydroxydiphenyl disulfide,97% 21101-56-4 5G 通用試劑  PorcineansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2ELISA試劑盒豬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

二基鱗醋 97% DIMqTHYLPHOSPHINIC cCID 383-1-3  HumanaibodytogroupAseptococcalpolysaccharide,ASPELISA試劑盒人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人慢性髓原細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)琥珀酸脫氫酶測(cè)試盒shēng huà shì jì容量:100/  PL7抗體/抗蘇酰NA合成酶(PL7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

巰基乙酸;硫代乙醇酸;代乙酸;氫硫基乙酸Mercaptoacetic acid;2-Mercaptoethanoic acid  兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PCP)免疫試劑盒 Rabbit Carboxyterminal propeptide of type procollagen,PCP ELISA Kit

明膠瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT  趨化因子受體3(CCR3)ELISA試劑盒 ,英文名: CCR3 ELISA Kit

3,4,5-氧基 3,4,5-Trimethoxy,97% 6443-69-2 10G 通用試劑  Rabbitcardiacoponin,cTn-ELISA試劑盒兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

洋滌皇皂苷 DIGITONIN 1104-4-1  Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody,ai-HAVELISA試劑盒人IgM抗體(ai-HAV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號(hào)21875-091)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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