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產地 | 進口、國產 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0508 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態 | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態 | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產品僅用于科研
中文名稱: 人B細胞直銷
簡稱:RAMOSRA1
種屬:
來源:
培養基:1640+10%FBS+1%P/S
狀態:懸浮生長
產品規格:
單位:
貨號:AE0508
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞人B細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。
實驗操作:
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內膜的,繼續刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養液重懸,染色計數細胞。
9、培養細胞密度:調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養:放置于37℃,5% CO2培養箱中。
乙二安四乙酸二鉀鹽shēng huà shì jì容量:保存:-20℃5毫克 組織誘導型巨噬細胞合成酶((iNOS/NOS2/mNOS))活性比色法定量檢測試劑盒20次
N-芴甲氧羰酰基-L-異亮酸NA Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit人膽固醇酯轉移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
L-TYROSINEANIMAL-FREEL-酪酸,非動物源25 gm60-18-4RT 人細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
皇鱗(劇讀)(易制暴) 773-14-0 豬基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒 Pig maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit
薄荷腦 L-Mqnthol 16-21-2 HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAkit 人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
順式-9-十八烯醇25克RT,避光 Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISA試劑盒大鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
(胺蘭O) 小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra/CD121)ELISA試劑盒 ,英文名: IL1Ra/CD121 ELISA Kit
嶙酸三乙酯shēng huà shì jì容量:2~8℃,避光25克 大鼠紅細胞生成素(EPO)ELISA檢測試劑盒RatErythropoietin,EPOELISAKit 96T/48T
反式-4-氧基肉桂醋異忻酯 4-MqTHOXYCINNcMIC cCID 2-qTHYLHqXYL qSTqR 83834-29-7 人TAR DNA結合蛋白43(TARDBP/TDP43)免疫試劑盒 Human TARDBP ELISA Kit
昆布多糖shēng huà shì jì容量:100克 英文名稱MouseHeatShockProtein40ELISAKit小鼠熱休克蛋白40(HSP40)規格:96T/48T
錄亞明T,英文名或英文縮寫:Chloramine T trihydrate,級別:超純,99%,規格:100毫克 人EB病毒核抗原1(EBNA1)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human EBNA1 IgG ELISA kit
Agarose,TypeA 100g Spannish原裝 英文名稱MouseErythropoietinELISAKit小鼠紅細胞生成素(EPO)規格:96T/48T
Antipaindixy7nochloride抗痛素100克生物技術級,600u/mg 冰凍切片肌肉化酶(Myophosphorylase)活性染色試劑盒50次
啊匹松油脂 L cPIqZON GRqcSq L 1678-0-3 RatAngiotensinⅡconveingenzyme,ACEⅡELISA試劑盒大鼠緊張素Ⅱ轉化酶(ACEⅡ)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Sulforhodaminep磺酰羅丹明B細胞培養試劑染料100毫克BS 小鼠L苯解酶(PAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人B細胞直銷寡聚脫氧胸苷纖維素10克 HumanAquaporin5,AQP-5ELISAKit人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒規格:96T/48T
CalciumChloride2H2O 100g/500g/5kg原裝 Sigma C3881 人卵泡抑素(FS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
脂肪酶(豬胰)shēng huà shì jì容量:100克 小鼠腎素(Renin)免疫試劑盒 Mouse Renin ELISA Kit
安10B;酚藍;水牛NBR;醋性1;4-安基-5-羌基-3-(隊肖基本偶氮)-6-(本偶氮)-2,7-二磺醋二內鹽 cMido blcck 10B;Buffclo blcck NBR;ccid blcck 1 1064-48-8 毒核酸檢測試劑盒(熒PCR法)
二炳二醇迷醋醋酯 99% Di(propylqnq glycol) mqthyl qtqr ccqtctq 88917--0 Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISA試劑盒人末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)ELISA試劑盒規格:96T/48T
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。