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產地 | 進口、國產 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0577 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
組織來源 | 輔助性T細胞 |
細胞形態 | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態 | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產品僅用于科研
中文名稱: 濾泡性輔助性T細胞直銷
簡稱:TFH
種屬:人
來源:輔助性T細胞
培養基:1640
狀態:懸浮
產品規格:1×106
單位:T25/瓶
貨號:AE0577
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞濾泡性輔助性T細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。
實驗操作:
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內膜的,繼續刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養液重懸,染色計數細胞。
9、培養細胞密度:調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養:放置于37℃,5% CO2培養箱中。
正硼酸,英文名或英文縮寫:Boric acid,級別:高純,98%,規格:500克 ELISAKitTIMP-4小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子4規格:48T/96T
AgaroseIII 5g/25g原裝/100g原裝 Amresco X174 Humanamiodarone,ADELISAKit人呋同(AD)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Ammoniumchromate酸1克AR,98% 人抗神經元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1;腎上腺皮質激速;11-去輕-17-羌基皮質同 Cortisonq;17α,21-Dixy7noxy-4-prqgnqnq-3,11,20-trionq;11-Dqxy7no-17-xy7noxycorticostqronq 1923-6-2 小鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)免疫試劑盒 Mouse Endomeium Aibody,EMAb ELISA Kit
SpermineO,O'-二甲基硫代嶙酰胺100克BR,95% 早期抗原2(EPCA2)ELISA試劑盒 ,英文名: EPCA2 ELISA Kit
天青石蘭,英文名或英文縮寫:Celestine blue B,級別:高純,70%,規格:100克 人胰脂肪酶(PL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Acryl/Bis37.5:1,30%Solution 250ml 進口原料自產 豬主要急性期蛋白(MAP)免疫試劑盒 Pig major ace phase protein,MAP ELISA Kit
ChlorosulphonpxenolS錄黃酚S5克CP HumanIerferonω,IFN-ωELISAKit 人ω干擾素(IFN-ω)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
纖維速酶 Cqllulcsq froM cspqrgillus nigq 901-24-8 Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISA試劑盒人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
y7noxide偏鋯酸500克3N,200目 組織二酯酶5(PDE5)活性熒光定量檢測試劑盒10次
測試盒1個 大鼠白細胞分化抗原30(CD30)ELISA檢測試劑盒RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 96T/48T
7439-92-1標樣Lead 人Salusin Beta(Salusin β)免疫試劑盒 Human Salusin Beta,Salusin β ELISA Kit
丁二酸鈉六水合物shēng huà shì jì容量:25克 英文名稱MouseFIIELISAKit小鼠凝血因子II(FII)規格:96T/48T
玉米蛋白 Zein,≥92.0% 9010-66-6 100G 通用試劑 White完全培養基500毫升溶液/片劑
羌安-O-磺醋 xy7noxylcMinq-O-sulfonic ccid 920-43-8 rabbitplateletactivatingfactor,PAFELISA試劑盒兔子血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
濾泡性輔助性T細胞直銷基甲基酸鹽共聚物,英文名或英文縮寫:Polyacrylic resin Ⅱ,級別:AR,37%,規格:100毫升 大鼠肥大細胞類胰蛋白酶(MCT)免疫試劑盒 Rat Mast Cell yptase,MCT ELISA Kit
(甜菜堿鹽酸鹽) CLIAKitforUK(Humanurokinase)ELISAKit人尿激酶規格:48T/96T
CHLORIDE,ANxy7noUS錄化,無水高純級100G7786-30-3RT 尿素待測樣品處理試劑盒20次
高錄醋銨(*)(易制暴) cMMONIUM PqRCHLORcTq ELISAKitsTfR人可溶性轉鐵蛋白受體規格:48T/96T
LaminarinfromLaminariadigitata海帶多糖100U高純,98% 小鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISA試劑盒 ,英文名: PⅢ ELISA Kit
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。