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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3690 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 黃桿菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Flavobacterium meningosepticumPCR
【貨號】: BKP3690
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
黃桿菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
FIP293細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞(亞系克隆) 貓腎細(xì)胞,F81細(xì)胞 CL-0276H-97(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2AMAC2-基酮5克BR
801-D (人巨細(xì)胞性細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2酮 Anthrone (ACS,97%) 90-44-8 10G 通用試劑
HBdSMC-c 人類膀胱平滑肌細(xì)胞(HBdSMC) 500,000cells 原代內(nèi)皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml愈創(chuàng)木酚;鄰羌基本迷 Guciccol;o-xy7noxycnisolq;1-xy7noxy-2-Mqthoxybqnzqnq 1990-2-1
超氧化物歧化酶分析試劑盒SODwo7iumD-glucuronateD-葡糖醛酸鈉2毫克 BR，98%
CD274 Others Rat 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) GuanidineHCl 250g/500g/1kg/5kg Amresco E424
小鼠腦脊神經(jīng)元MN-r鎢粉（200目）(>99.8%,BR)Tungsten powder質(zhì)量規(guī)格：>99.8%,BR
LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鎢酸(>98%,BC)Tungstic (VI) acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]真菌(>98%,BC)Verruculogen from Penicillium verruculosum質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK-52E 胸膜細(xì)胞瘤，SMC-1細(xì)胞 RIN-m細(xì)胞，褐鼠胰島素瘤上皮細(xì)胞羊毛脂Wool fat質(zhì)量規(guī)格：BR
Hep-2, 人細(xì)胞系 Human5-溴-4-氯-3-吲哚基-Β-D-葡萄糖醛酸鈉鹽X-GLUC, salt質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級
黃桿菌PCR檢測試劑盒說明書上皮細(xì)胞生長添加物PEpiCGSL-天冬氨酸-β-芐酯/L-天冬氨酸-4-芐酯L-Aspartic acid β-benzyl ester質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-苯丙氨酸L-Phenylalanine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SH-SY5YL-天冬酰胺;L-天冬酰一水 L-Asparagine Monohydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,一水
大鼠細(xì)胞;MMQ 腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞，SW-13細(xì)胞 Neuro-2a[N2a;Neuro-2a]細(xì)胞，小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞L-甲硫氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Mine質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞 HumanL-甲硫氨酸L-Mine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
615小鼠株;Ca763 小鼠卵巢成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1-本基-3-吡唑烷酮50U
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 Mouse2,4-二錄酚 2,4-Dichlorophqnol 10-83-
CES2 Others Human 人 CES2 / Carboxylesterase-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DEAE葡聚糖5克
人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA鉍粒5克
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 6361-21-32-錄-5-硝基2-Chloro-5-nitno
PCR檢測試劑盒：
黃桿菌PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
