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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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人病毒33PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BKP3842
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2025-03-19
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BKP3842
用途 公司產品僅用物科研
包裝規格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產品名稱

英文名稱

貨號

人病毒33PCR檢測試劑盒說明書

Human Papillomavirus 33(HPV33)33   PCR

BKP3842

技術服務內容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢:
1. 特異性:人病毒33PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
 2.   
重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%
3.   
靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

MET Others Human c-MET / HGFR (aa 956-1390) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) EDTA四鈉鹽,英文名或英文縮寫:EDTA tetrawo7ium salt,級別:BR,98%,規格:10

CL-0364HuT 78(T細胞細胞)5×106cells/瓶×2四甘醇 Bis[2-(2-xy7noxyqthoxy)qthyl] qtqr 11-60-7

HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系 人絨癌細胞VP16耐藥株TNFa轉染,JEG-3/VP16-TNFa細胞 7F2(小鼠雜交瘤細胞)本亞磺酸鈉,英文名或英文縮寫:Benzenesulfinic acid wo7ium salt,級別:高,99%,規格:500ul*100

人細胞;A-427 [A427]二乙?;?,英文名或英文縮寫:2,4-Pentanedione,級別:BR,規格:2

CD7 Others Mouse 小鼠 CD7 人細胞裂解液 (陽性對照) PEG400 200g Sigma分裝
SV40
轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1全氟辛酸(分析標準品, 用于環境分析)Pentadecafluorooctanoic acid質量規格:分析標準品, 用于環境分析

IFNA5 Others Human IFNαG / IFNaG / Ierferon alpha-G 人細胞裂解液 (陽性對照) 正辛酸(分析標準品,99.9%(GC))n-Octanoic acid質量規格:分析標準品,99.9%(GC)

豚鼠皮膚細胞;GP-S2蓖麻油酸(分析標準品,99%)Ricinoleic acid質量規格:分析標準品,99%

IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 人細胞裂解液 (陽性對照) 硬脂酸(分析標準品,99.5%(GC))Stearic acid質量規格:分析標準品,99.5%(GC)

CL-0093HCC1937(人癌細胞)5×106cells/瓶×2甜蜜素(標準品) Cyclamate質量規格:分析標準品
人病毒33PCR檢測試劑盒說明書5-8F, 人高轉移細胞系(6S)-四氫-L-二硫酸生物蝶呤(6S)-Tetrahydro-L-biopterin Disulfate質量規格:美國進口

白介素-2轉染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2 大鼠腸內皮細胞完全培養基 100mL(6S)-四氫-L-硫酸生物蝶呤(6R)-Tetrahydro-L-biopterin Sulfate質量規格:美國進口

組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)/1ml7,4'-二羥基黃酮(標準品)7,4'-DIHYDROXYFLAVONE質量規格:供含量測定用

PILRA Others Human PILR-alpha / PILRA 人細胞裂解液 (陽性對照) 千金子素L1(標準品)Euphorbiasteroid質量規格:供含量測定用

小鼠;P19異型南五味子丁素(標準品)heteroclitin D質量規格:含量測定
人細胞;PC-3 [PC3]wo7iumD-pantothenate右旋泛酸鈉100CP,97.5%

PDE1C Others Human PDE1C 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 二硫化鉬 Molybdenum disulfide,99% 1317-33-5 100G 通用試劑

人海馬神經元G,D,X-401 GDX-401

RLFs, 大鼠 R1000細胞 WISH(羊膜細胞)D-白酸,英文名或英文縮寫:D-Leucine,級別:BR99%,規格:5

人結直腸腺癌細胞;LoVo16872-11-0四扶硼酸Fluoroboric acid
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


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