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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3911 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
詹姆士城峽谷病毒PCR檢測試劑盒供應 | Jamestown Canyon Virus (JCV)RTPCR | BKP3911 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優勢:
1. 特異性:詹姆士城峽谷病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
人肺轉化細胞;AE1201Dipxenylcarbazone二本基卡巴腙25克CP,13.5-15.5%
猞猁皮膚成纖維樣細胞;ELS1 大鼠腎細胞,NRK細胞 NBTF細胞,新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞還原型輔酶Ⅰ二內鹽(+4°C) bqtc-Nicotincmidq cdqninq dinuclqotidq diwo7ium sclt 606-68-8
人羊膜細胞;WISH苔酚 Orcinol monohydrate (≥99%, from liche... 6153-39-5 5G 染色劑
HA Others H12N5 甲型 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) Coronene六本并本1克CP
SF9, 昆蟲卵巢細胞L-OrnithineHCl 10g/25g/50g/100g 國產
MDA-MB-231(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 噻托溴銨一水合物Tiotropium bromide hydrate 質量規格:度>99%
豚鼠胚胎細胞;104C1鹽酸胺酮Amiodarone HCl質量規格:purity>99.5%,EP6,BR
CALR Others Human 人 CALR / Calreticulin 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸胺酮(標準品)Amiodarone HCl質量規格:HPLC>98%,標準品
腦成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)阿莫曲普坦蘋果酸鹽Amotriptan malate質量規格:>98.5%,BR
Ramos細胞,血細胞瘤細胞系 615小鼠前瘤株,Fc細胞 人成纖維細胞-心房裂解物HCF-aa L阿糖腺苷Vidarabine/Ara-A質量規格:>99%,BR,可用于細胞培養
詹姆士城峽谷病毒PCR檢測試劑盒供應PLAUR Others Mouse 小鼠 uPAR / PLAUR / CD87 人細胞裂解液 (陽性對照) 雙乙酸鈉 diacetate質量規格:>99%
管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)L-甘-谷二肽,甘氨酰-L-谷氨酰胺一水合物Glycyl-L-glutamine monohydrate質量規格:>99%,BR
BTC Others Cynomolgus 食蟹猴 BTC / Betacellulin 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-羥基多沙唑嗪6-Hydroxy Doxazosin質量規格:美國進口
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino7-羥基多沙唑嗪7-Hydroxy Doxazosin質量規格:美國進口
16HBE細胞,人上皮細胞 化學轉化小鼠鼻咽上皮細胞,TMNE細胞 CL-0178OVCAR-3(人細胞)5×106cells/瓶×2恩替卡韋 Labeled d2, 15N, 13CEntecavir Labeled d2, 15N, 13C質量規格:美國進口
人胚腎二倍體細胞;HEK-2 人直腸平滑肌細胞完全培養基 100mLNADTRIHYDRATE氧化型輔酶Ⅰ試劑級米白色凍干粉FROZENsigma
人腎系膜細胞RNAHRMC miRNA5 μg4,4’-二羌基二本同 4,4'-Dixy7noxybqnzophqnonq 611-99-4
ADK Others Human 人 ADK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) SCCRAM肉湯250克RT
水貂肺上皮細胞;Mv.1.Lu(NBL-7)4-metxYLUMBELLIFERYLPHOSPHATE4-甲基傘花基嶙酸鈉三水 (MUP)超級白色至灰白色粉末FROZENsigma
SHG-44細胞,細胞 NCTC克隆929細胞,L129細胞 人T瘤細胞Jurkat亞系;Jurkat77(福林酚)
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。