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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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非洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4018
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-03-17
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4018
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

非洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書

Mycobacterium africanumPCR

BKP4018

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 人細胞裂解液 (陽性對照) 菊芬,英文名或英文縮寫:Inulin,級別:生物技術(shù)級,98%,規(guī)格:5毫克

KYSE510 (s)-(+)-α-氧基-α-(三拂基)本酰錄 (S)-(+)-cLPHc-MqTHOXY-cLPHc-TRIFLUOROMqTHYLPHqNYLcCqTYL CHLORIDq 0442-33-4

Ca Ski人腸轉(zhuǎn)移細胞 Ca human cervical carcinoma Ski cells in iestinal metastasis RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSL(-)木糖 L-XYLOSq 609-06-3

FLT3LG Protein Human 重組人 FLT3L / Flt3 ligand / FLT3LG 蛋白 (His 標(biāo)簽)BESTATIN貝他定(本丁抑制素)超級10MG58970-76-6Frozen

小鼠纖維細胞(MLF)(5×105) MiaPaCa-2, 人細胞 Human16052-06-5N-()-N-丙磺酸 (EPPS)EPPS
EL4.IL-2
小鼠瘤細胞腺苷激酶抑制劑Adenosine Kinase Inhibitor質(zhì)量規(guī)格:美國進口

ERBB2 Others Rhesus 恒河猴 ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-氨基腺苷2-Amino Adenosine質(zhì)量規(guī)格:美國進口

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-B55'-乙基酰胺基-2',3'-亞異丙基腺苷5'-Ethylcarboxamido-2',3'-isopropylidene Adenosine質(zhì)量規(guī)格:美國進口

CD81 Others Human CD81 / TAPA-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 別嘌醇核苷Allopurinol riboside質(zhì)量規(guī)格:美國進口

CM-M069小鼠腎成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mLN-乙酰兩性霉素BN-Acetyl Amphotericin B質(zhì)量規(guī)格:美國進口
非洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書FGF14 Protein Human 重組人 FGF14 / SCA27 蛋白 (isoform 1B)DL-丙氨酰-DL-丙氨酸DL-Ala-DL-Ala質(zhì)量規(guī)格:0.97

BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 人腸微內(nèi)皮細胞HIMECN-乙酰-DL-谷氨酸Ac-DL-Glu-OH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

人表皮角質(zhì)細胞-胎兒HEK-fDL-α-氨基己二酸,2-氨基己二酸DL-a-Aminoadipic acid質(zhì)量規(guī)格:>97%,混旋

VIPR2 Others Human VIPR2 / VPAC2 人細胞裂解液 (陽性對照) DL-半胱氨酸鹽酸鹽,一水DL-Cysteine·HCl·H2O質(zhì)量規(guī)格:0.98

兔眼Tenon's囊成纖維細胞;RYTFDL-胱氨酸鹽酸鹽DL-Cysteine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
S-180
細胞,腹水瘤細胞 人細胞,CRL-2780細胞 非洲綠猴腎細胞;VERO順式(2,3)-二氫丁苯那嗪質(zhì)量規(guī)格:美國進口cis (2,3)-Dihydro Tetrabenazine

大鼠小腸隱窩上皮細胞;IEC-6反式(2,3)-二氫丁苯那嗪質(zhì)量規(guī)格:美國進口trans (2,3)-Dihydro Tetrabenazine

SCARB1 Others Mouse 小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟米三甲基乙酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口Flumethasone pivalate

上皮細胞培養(yǎng)基MEpiCM-prf愛維莫潘質(zhì)量規(guī)格:美國進口Alvimopan

HA Others H7N2 甲型 H7N2 (A/ruddy turnstone/New Jersey/563/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-去甲基拓撲替康質(zhì)量規(guī)格:美國進口N-Desmethyl Topotecan

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:非洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。


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