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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4038 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
分枝桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書 | Mycobacterium spp.PCR | BKP4038 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標簽)L(+)-2-基-5-脲戊酸,英文名或英文縮寫:L-Citrulline,級別:BR,99%,規格:25克
HCC94(人子宮鱗癌細胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2 肝動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1,2-二基本;鄰二基本 1,2-Diqthylbqnzqnq 132-01-3
HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞桑色速;摩林;皇;2′,3,4′,5,7-五羌基皇同 Morin;Tqtrcxy7noxyflcvcnol;2′-xy7noxypqlcrgidqnolon;Ncturcl yqllow 8;Ncturcl yqllow 11;C.I. 75660 624022-01-3
SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) 媒染藍B,英文名或英文縮寫:Acid alizarin blue B,級別:ACS級,規格:1克
人正常肺上皮細胞;BEAS-2B1114-34-7D-來蘇糖D-LYXOSE
DYRK3 Others Human 人 DYRK3 / REDK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 雙壁碳納米管(>50%) 小于5nm(直徑),5-15μm(長度)Carbon Nanotube Double-walled (>50%) below 5nm(diam.), 5-15μm(length)質量規格:
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-4D6交叉縫式碳納米管 10-20nm(直徑),5-15μm(長度)Carbon Nanotube Herringbone 10-20nm(diam.), 5-15μm(length)質量規格:>95%(TPO Method)
COLO 205細胞,細胞 正常人肝細胞,L-02細胞 CL-0056CCD-1095Sk(人浸潤性導管癌旁皮膚細胞)5×106cells/瓶×2復壁碳納米管 小于10nm(直徑),5-15μm(長度)(允許溫度上限:620℃)Carbon Nanotube Bundled Multi-walled below 10nm(diam.), 5-15μm(length) (allowable temperature limit : 620°C)質量規格:
人APP基因轉染CHO細胞株;7WD10復壁碳納米管 小于10nm(直徑),5-15μm(長度)Carbon Nanotube Multi-walled below 10nm(diam.), 5-15μm(length)質量規格:>95%(TPO Method)
CLEC4M Others Human 人 CD299 人細胞裂解液 (陽性對照) 復壁碳納米管 小于10nm(直徑),1-2μm(長度)Carbon Nanotube Multi-walled below 10nm(diam.), 1-2μm(length)質量規格:>95%(TPO Method)
分枝桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 5,5-二甲基-1,3-環己二酮5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedione質量規格:BR
JeKo-1 人套細胞瘤細胞5-氟胞苷(>98%,BR)5-Fluorocytidine質量規格:>98%,BR
22RV1人細胞 Human prostate cancer 22RV1 cells 人4-甲基傘形酮-β-D-木糖苷4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews質量規格:0.99
其他細胞因子2-脫氧-D-核糖2-Deoxy-D-Ribose質量規格:>98%,BR
小鼠海馬趾神經細胞(MH-h)(1×106) HCT116, 人結細胞 HumanD-半乳糖(標準品)D-Galactose質量規格:HPLC≥98%,標準品
大鼠細胞;Y3-Ag 1.2.32,7-二溴芴(>98.0%(GC))質量規格:>98.0%(GC)2,7-Dibromofluorene
QG-56細胞,肺扁平上皮癌細胞 人口腔上皮癌長春新堿耐藥株,KB/V細胞 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C22,7-二溴-9-芴酮(>98.0%(GC))質量規格:>98.0%(GC)2,7-Dibromo-9-fluorenone
小鼠腹水瘤細胞;S-1802,7-二溴萘(>98.0%(GC))質量規格:>98.0%(GC)2,7-Dibromonaphthalene
IFNGR1 Others Human 人 IFN-gamma R1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,7-二溴-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(HPLC)(T))質量規格:>98.0%(HPLC)(T)2,7-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]
人小腦顆粒細胞裂解物HCGCL2,6-二甲基-3,5-庚二酮(>97.0%(GC))質量規格:>97.0%(GC)2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione
特點優勢:
1. 特異性:分枝桿菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。