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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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細頸線蟲通用PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BKP4082
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-03-17
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BKP4082
用途 公司產品僅用物科研
包裝規格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產品名稱】: 細頸線蟲通用PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Nematodirus spp.PCR
【貨號】: BKP4082
【儲存條件及有效期】:
-20
避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300
ABI7500LightCycler 480iCycleriQ5CFX96SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u
樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集;
u
存放:樣本在2~8條件下保存應不超過72h-70以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u
運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產品。

組成及試劑配制:

酶標板:一塊(96孔)
2
標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L100 U/L50 U/L25 U/L12.5 U/L6.25 U/L3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml 200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3
樣品稀釋液:1×20ml
4
檢測稀釋液A1×10ml
5
檢測稀釋液B1×10ml

細頸線蟲通用PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
(2)
靈敏度高
PCR
產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3)
簡便、快速
PCR
反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在24 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4)
對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

CM-M088小鼠破骨細胞完全培養基100mL乙二酸鍶,英文名或英文縮寫:Strontium oxalate,級別:CP69%,規格:250毫升

A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株 小細胞細胞,LIEP-P細胞 DT40(雞瘤細胞)7-氧基-2-四輕同 7-Mqthoxy-2-tqtrclonq 4133-34-0

小鼠細胞;BC3H1(-)-薄荷醇,英文名或英文縮寫:Menthol,級別:CP70%,規格:25

CTLA4 Others Human CTLA4 / CD152 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-脫氧尿苷-5-三嶙酸四鈉鹽5

tTA基因修飾的小鼠(B);P19-CAG-tTA-1D3(15-30)(多聚-L-賴酸)
CD69 Others Human
CD69 人細胞裂解液 (陽性對照) Tigecycline質量規格:含量>99.0%

小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32(標準品)Tigecycline質量規格:HPLC>98%,標準品

TDGF1 Others Rat 大鼠 Cripto / TDGF1 人細胞裂解液 (陽性對照) 替米考星Tilmicosin質量規格:干品度≥90.0%,干品含量≥85.0%USP34

原代肝實質細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml替米考星(標準品)Tilmicosin質量規格:含量測定

RCC-krause細胞,細胞 人細胞,CaSKi細胞 人內根殼細胞總RNAHHIRSC NA馬來酸噻嗎洛爾Timolol Maleate質量規格:>99%,USP
細頸線蟲通用PCR檢測試劑盒說明書人上皮細胞;Hep-2 大鼠食管平滑肌細胞完全培養基 100mL乙酰唑胺Acetazolamide質量規格:>99%

腦膜細胞培養基MenCM-prfBr-Mmc (=4-溴甲基-7-甲氧基)(>98.0%(T))Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin)質量規格:>98.0%(T)

SCN3B Others Human SCN3B 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-溴甲基-7-甲氧基-1,4-苯并惡嗪-2-(>98.0%(T))3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one 質量規格:>98.0%(T)

大鼠肺大動脈內皮細胞完全培養基 100mL4-溴甲基-6,7-二甲氧基(>98.0%(HPLC))4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin 質量規格:>98.0%(HPLC)

BLU-87 人膀胱移行細胞癌 BLU-87 human bladder ansitional cell carcinoma RPMI1640 (內含2mM-glutamine)+10%胎牛血清 DBD-CO-Hz [=4-(N,N-二甲基氨基磺酰)-7-(N-肼基羰甲基-N-甲基)氨基-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(HPLC))
雜交瘤(B);Z51B3C10H12A12G2F7B5TESTris乙磺酸,2-[(三(羥甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸質量規格:>99%,ARTES

中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF 肥大細胞瘤細胞,P815細胞 INS-1細胞,大鼠細胞3-[ (N-(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸鈉質量規格:>98%,BRTAPSO mono

293來源病毒包裝細胞;ΦA-GPTAPSO3-[ (N-(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸質量規格:>99%,BRTAPSO

STIM1 Others Human STIM1 / GOK 人細胞裂解液 (陽性對照) N-(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸鈉質量規格:>99%,BRTAPS  Salt

神經元細胞Many types of cells包裝:5 ×105(1ml)S-I-G-S-L-A-K質量規格:>95%,BRS-I-G-S-L-A-K

PCR檢測試劑盒:

細頸線蟲通用PCR檢測試劑盒說明書 ()RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)
Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min
(2)
移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min
(3)
上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min
(4)
加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min
(5)4oC 12000g
離心15min
(6)
仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)
加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min
(8)4oC 12000g
離心10minEP管底部可見白色沉淀物。
(9)
棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g
離心5min
(11)
吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)
半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存備用。
(13)
所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0
(14)
取所提取的總RNA1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s18s兩條rRNA


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