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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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剛地弓形蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BKP4454
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-17
  • 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BKP4454
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測(cè)或-20長(zhǎng)期保存。
4
PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱(chēng)

英文名稱(chēng)

貨號(hào)

剛地弓形蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

Toxophasma gondiiPCR

BKP4454

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:剛地弓形蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   
實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

Araliadiol  中文名:  分子式:C15H20O2    總基酸(TAA)測(cè)試盒   The total amino acid (TAA) test kit

Antipyrine  中文名:安替比林  分子式:C11H12N2O    羥脯酸測(cè)試前處理試劑   Preeatme reage hydroxyproline test

Anthraquinone-2-carboxylic acid  中文名:蒽醌-2-羧酸  分子式:C15H8O4       Hydroxyproline (Hyp) test kit

Anthraquinone-1,5-disulfonic acid di salt  中文名:蒽醌-1,5-二磺酸二鈉鹽  分子式:C14H6Na2O8S2    羥脯酸(Hyp)測(cè)試盒   Glamine syhetase (GS) test kit              

Anthraquinone  中文名:蒽醌  分子式:C14H8O2    總堿度測(cè)定試劑盒   Total alkalinity determination kit
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2-(2-Aminothiazole-4-yl)-2-methoxyiminoacetic acid  中文名:氨噻肟酸  分子式:C6H7N3O3S  度:98.0%

兔子孕激素elisa試劑盒   兔子孕激素試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   兔子孕激素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子孕激素試劑盒、兔子孕激素eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  Adipic dihydrazide  1071-93-8  中文名:己二酸二  分子式:C6H14N4O2  度:99.0%  關(guān)鍵詞: 

兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol  129141-48-6  中文名:  分子式:C8H16O4  度:98.0%  關(guān)鍵詞:  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

兔子孕激素/(PROG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Adrenosterone  中文名:腎上腺甾酮  分子式:C19H24O3 

兔子孕激素/(PROG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol  1207441-49-3  中文名:  分子式:C29H46O3
剛地弓形蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)IL1RAPL1 Others Human IL-1R8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸伐昔洛韋水合物質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Valacyclovir hydrochloride hydrate

A-375 [A375], 人惡性素瘤細(xì)胞株17-酮基維庫(kù)溴銨質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口17-Keto Vecuronium Bromide

NINJ1 Others Rat 大鼠 Ninjurin-1 / NINJ1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-去乙酰基維庫(kù)溴銨質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口3-Desacetyl Vecuronium

大鼠腦平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL玉米素核苷同分質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Zeatin riboside mixed Isomers

B95-8絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞 B95-8 EBV conversion of leukocyte marmoset RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS鹽酸多沙普侖質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Doxapram hydrochloride
人胚胎腸粘膜組織來(lái)源細(xì)胞;CCC-HIE-2液體生物防腐劑,英文名或英文縮寫(xiě):Proclin 300,級(jí)別:AR99%,規(guī)格:25

ACVR1 Others Canine ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 碳醋鉍;減式碳醋鉍;碳醋氧鉍;碳醋鉍 BisMuth subccronctq;BisMuth(III) ccronctq bcsic;BisMuth oxyccronctq 289-10-4

非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-磺酸,英文名或英文縮寫(xiě):Sulfamic acid,級(jí)別:BR97%,規(guī)格:500

CW-2細(xì)胞,人細(xì)胞 人色素瘤細(xì)胞,A875細(xì)胞 人急性早幼粒細(xì)胞;HL-60PEPSTATIN胃蛋白酶抑制劑蛋白組學(xué)級(jí)25MG26305-03-3COLD

HCT-15(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(果膠酶Y-23)
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。


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