91精品视频免-91精品视频免费播放-91精品视频免费观看-91精品视频免费看-91精品视频免费在线观看-91精品视频网

上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
聯(lián)系熱線
  • 聯(lián)系人:黃先生
  • 電 話:021-60767003
  • 郵箱:2843593679@qq.com

熊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒反應(yīng)五要素

發(fā)表時(shí)間:2020-07-13

熊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒反應(yīng)五要素:

設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。


聯(lián)系方式
手機(jī):13564080845
主站蜘蛛池模板: 国产精品成人无码av无码免费 | 国产白浆在线视频网 | 2025国产成人精品视频人 | 国产精品一级毛片无码 | 精品无码专区亚洲 | 成人无码区免费aⅴ片在线观看 | 国产无套在线观看视频 | 国产精品毛片v一区二区三区 | 国产精品日产欧美一区二区三区 | 国产女人喷潮免费视频 | 国产精品毛片无码一区二区蜜 | 国产精品无码色一区二涩欲区三区 | 国产一区二区三区在线视頻 | 国产最新精品一区二区三区 | 国产精品高清m3u8在线播放 | 精品国产又粗又大又黄又硬 | 精品韩国乱人伦久久久久久 | 国产精品免费久久久久久久蜜桃 | 99久久精品亚洲国产 | 精品久久国产综合婷婷五月 | 国产精品国三级国产av视色 | 成人无码精品1区2区3区免费看 | av无码不卡在线观看免费 | 国产av无码专区亚洲av男同 | 国产精品一线免费观看 | 国产黄三级高清在线观看播放 | 精品国内自产拍在线观看 | 1024国产精品自拍 | av无码a一在 | 国产成人久久精品综合 | av免费网址在线看 | 国产成人视频在线观看 | 国产+sm+调教 | 国产精品成人99电影 | aⅴ在线视频 | 99久久精品国产片 | 国产三级在线播放网址 | 国产私拍一区二区三区 | 国产精品一区二区亚洲推荐 | 国产精品久久久久久久妇丈 | 国产v亚洲v天堂 |