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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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植物總蛋白質微量提取試劑盒實驗步驟

發表時間:2021-11-19
植物總蛋白質微量提取試劑盒實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

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HEC-1-A(人子宮內膜腺癌細胞)
HEC-1-B(人子宮內膜腺癌細胞)
Hela(人宮頸癌細胞)
Hep 3B(人肝癌細胞)
Hep G2(人肝癌細胞)
HEp-2(人喉表皮樣癌細胞)
Hepa 1-6(小鼠肝癌細胞)
HFL1(人肺成纖維細胞)
HGC-27(人胃癌細胞)
HIC(人小腸癌細胞)
HK-2(人腎小管上皮細胞)
HL-60(人早幼粒急性白血病細胞)
HL-7702(人肝正常細胞)
HMy2.CIR(人B淋巴母細胞)
HO-8910(人卵巢癌細胞)
Hs 578T(人乳腺癌細胞)
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HT-1080(人纖維肉瘤細胞)
HT-29(人結腸癌細胞)
HuH-6(人肝母細胞瘤細胞)
HuH-7(人肝癌細胞)
Hut-102(人皮膚T淋巴瘤細胞)
HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內皮細胞)
IBRS-2(豬腎細胞)
IMR-32(人神經母細胞瘤細胞)
J82(人膀胱癌細胞)
JAR(人胎盤絨毛膜癌細胞)
JEG-3(人絨毛膜癌細胞)
JeKo-1(人套細胞淋巴瘤細胞)
Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細胞白血病細胞)
K-562(人慢性骨髓性白血病細胞)
KB(人口腔表皮樣癌細胞)
KG-1(人急性骨髓性白血病細胞)
KLE(人子宮內膜癌細胞)
KU812(人外周血嗜堿性白血病細胞)
L1210(小鼠白血病細胞)
L6(大鼠成肌細胞)
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維
Lec1(倉鼠卵巢細胞)
Li-7(人肝癌細胞)


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